陰イオン交換クロマトグラフィーによるアミノ酸・タンパク質の分離

本ページでは、陰イオン交換クロマトグラフィーによるアミノ酸・タンパク質の分離について説明しています。

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陰イオン交換クロマトグラフィーでアミノ酸・タンパク質の分離を行うと、
等電点の高い(塩基性の強い)アミノ酸・タンパク質から順に溶出される。

 

陰イオン交換クロマトグラフィーによるアミノ酸またはタンパク質の分離では、
まず、全てのアミノ酸またはタンパク質を陰イオン交換体に結合させる。
そのために、分子全体として負電荷を帯びるよう移動相のpHを高くするが、
少なくとも等電点より高いpHにしなければ負電荷を帯びない。

 

次に移動相のpHを段階的に下げていくと、
等電点の高い(塩基性の強い)アミノ酸・タンパク質から順に負電荷を帯びなくなって溶出していく。

 

例えば、
陰イオン交換クロマトグラフィーでアルギニン、グルタミン酸、グリシンの分離を行うと、
最も塩基性の強い(最も等電点の高い)アルギニンが最初に負電荷を帯びなくなって溶出され、
次に2番目に等電点の高い中性アミノ酸のグリシンが溶出され、
最後に最も酸性の強い(最も等電点の低い)グルタミン酸が溶出される。

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